向希雄教授通过自拟通鼻止咳方治疗小儿上气道咳嗽综合征，方中木蝴蝶与黄芩相须为用来发挥其抗炎抗免疫反应的功效。

1.4.5菌株DTCO3-L-鼠李糖苷酶酶学性质研究-L-鼠李糖苷酶的最适温度及热稳定性：试管中各加入170LpH6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液和20L10mmol/LpNPR，分别在20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃下预热15min后加入10L酶液,反应20mim后，测定酶活,最高酶活性设为100%。80℃水浴锅静置15min后即为PCR模板。

引物合成：南京思普金生物公司。1.2主要设备及药品SW-CJ-1D单人超净工作台：苏州净化设备有限公司。1.4.2菌株DTCO3的鉴定根据《伯杰氏细菌鉴定手册》对菌株DTCO3进行形态学观察和生理生化鉴定。挑取产生透明圈的菌落在LB培养基上分离纯化。1.4.3菌株DTCO3的16SrDNA扩增及分析用灭菌的牙签蘸取菌株DTC03，加入至20uL裂解液。

酶液分别20℃、30℃、40℃、50℃、60℃和70℃条件下保温1h后测定其酶活力，最高酶活性设为100%，探究温度对其稳定性的影响。IMark酶标仪：伯乐生命医学产品有限公司。1.6.2.1全血RNA的提取及CdNA的合成将带回实验室的血样解冻后立即提取全血RNA并进行反转录，具体步骤依照QuICkRNATMWHolEBloodCATAloGNos。

而且中草药具有毒副作用小、促进生长、促进动物新陈代谢、无耐药性、提高饲料报酬、预防疾病等优点，它克服了化学合成药物毒副作用大的缺点，是新一代安全性能较好的饲料添加剂。1.6.2.2引物的合成根据GENBANk数据库中IL-2、IL-6、IL-8、IL-100、TLR-3、TLR-4和-actIn的基因序列，利用pRIMER5软件设计引物，详细序列信息见表2，所有引物序列均由武汉金开瑞生物工程有限公司进行合成。1.3试验饲粮基础饲粮组成见表1，营养参数参考农业行业标准NY/T33-2004配制。近年来，肉鸡养殖中抗生素的滥用导致致病菌的耐药性越来越强，兽药残留造成鸡肉食品安全问题受到消费者的密切关注，随着2020年无抗禁令的实施，我国肉鸡养殖进入无抗养殖时代，替抗产品的研究成为新的热点，中草药制剂、酶制剂、微生态制剂、植物精油等均被认为是潜在的替抗产品。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：板蓝根，黄芪，女贞子，柴胡。声明：本文所用图片、文字来源《中草药》，版权归原作者所有。

R1201试剂盒及反转录试剂盒说明进行。1.5.2免疫器官的采集42日龄，以重复为单位每笼抽取与平均体质量接近的2只鸡（公母各1只），称其活质量，屠宰解剖后立即分离胸腺、脾脏、法氏囊，用滤纸吸去血渍，剔除脂肪组织后称鲜质量，并计算免疫器官指数。饲养期为42d，分前期（0～21d）和后期（22～42d）2期进行。中草药作为一种绿色添加剂广泛应用于畜牧养殖业，其生物活性物质能够促进动物健康生长，使畜禽机体内环境保持平衡状态。

但是中草药具有配伍不相容、用量大、作为添加剂使用缺乏统一的质量检验标准等缺点，复方中草药调节机体免疫功能的作用机制认识尚不清楚，还需进一步研究和探讨。肉鸡为科宝505白羽肉鸡，购自陕西宝鸡大成禽业有限公司。1.6.2细胞因子测定以actIn基因作为内参基因，实时荧光定量测定肉鸡血液中IL-2、IL-6、IL-8、IL-100、TLR-3、TLR-3基因的mRNA相对表达量。1.5样品采集1.5.1血液样品采集分别于21、28、35、42d以重复为单位，在A组和d组中每笼抽取与平均体质量接近的2只鸡（公母各1只）采集翅下静脉全血，混合后-20℃保存，饲养试验结束后带回实验室用于细胞因子的检测。

试验期内保持鸡舍内正常通风，按常规免疫程序进行免疫，每日巡栏观察鸡群精神状态和采食情况，早晚各消毒1次，保持鸡舍内外空气清洁卫生。RNA提取试剂盒购自美国纽英伦生物技术公司（NEB），SYBRqPCRSuperMIx购自近岸科技有限公司，RNA反转录试剂盒购自瑞士罗氏制药有限公司，其他化学试剂均购自美国SIGMA生物科技有限公司。

1.4饲养管理试验肉鸡饲养管理参照《科宝肉鸡饲养管理手册》。本试验旨在评估复方中草药对肉鸡生长性能、免疫器官发育指数及天然免疫相关基因mRNA表达的影响，为复方中草药在家禽生产中的应用以及替代抗生素的可行性提供参考。

1.2试验设计本试验采用单因素完全随机设计，选择1日龄健康白羽肉鸡504只，按照组平均体质量相近原则分为7组，每组6个重复，每个重复12只鸡，公母各半，分别饲喂基础饲粮（对照组，A组）、基础饲粮＋抗生素（0.48G/kg氟苯尼考，1～42d，B组）、基础饲粮＋100mL/kg复方中药制剂提取物（C组，14～42d）、基础饲粮＋100mL/kg复方中药制剂提取物（d组，21～42d）、基础饲粮＋100G/kg复方中药粉末制剂（E组，14～42d）、基础饲粮＋100G/kg复方中药粉末制剂（F组，21～42d）、基础饲粮＋20G/kg复方中药粉末制剂（G组，14～42d）声明：本文所用图片、文字来源《中国中药杂志》，版权归原作者所有。李媛等用紫外分光光度法对文冠果壳总多酚含量进行测定。相关链接：黄酮，山柰酚，葡萄糖苷。1.3脂肪酸类文冠果的脂肪酸类成分主要分布在文冠果种子（种仁、种皮）及果壳等部位。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。

程文明等采用气相色谱-质谱联用技术对文冠果壳中脂肪酸类成分进行分析，确定21种脂肪酸结构及含量，分别为：己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、10-甲基-十一烷酸、豆蔻酸、12-甲基-十四烷酸、棕榈油酸、棕榈酸、十七烷酸、亚油酸、油酸、硬脂酸、二十碳-11-烯酸、花生酸、芥酸、山嵛酸、二十三烷酸、二十四碳-15-烯酸和木焦油酸，其中8种脂肪酸在该植物中首次报道。此外，国外学者又从花的萼片中分离得到白蜡树皮苷和少量七叶苷。

杨倩等建立了以杨梅素为对照品，紫外分光光度法测定文冠木总黄酮含量的方法，测得文冠木总黄酮的质量分数为14.62~39.93 mgg-1，同时建立了高效液相色谱法测定了文冠木中6种单体黄酮成分的含量，表没食子儿茶素的质量分数为2.01~7.10 mgg-1、儿茶素为0.11~1.37 mgg-1、表儿茶素为1.33~4.26mgg-1、二氢杨梅素为1.06~5.42 mgg-1、二氢槲皮素为0.03~0.95mgg-1、杨梅素为0.05~1.40 mgg-1。杨小慧等采用紫外分光光度法测定黄酮含量，采用显色反应、傅里叶红外光谱和高效液相色谱三者相结合的方法分析黄酮单体种类，测得文冠果落果中黄酮含量为18.4 mgg-1。

牟洪香等采用气相色谱方法，对14个地区的文冠果种仁油脂肪酸进行了分析，测得种仁油含有11种脂肪酸，碳链长度主要集中在C16~C18。1.6酚酸和有机酸类李占林从文冠果果壳70％乙醇提取物和总皂苷酸水解产物中鉴定出的酚酸和有机酸有原儿茶酸、原儿茶酸乙酯、香草酸、4-羟基苯甲醛、3,4,5-三甲氧基苯甲酸、4-羟基苯乙酸、2-羟基-6-甲基苯甲酸、丁二酸及酪醇。

1.7其他类文冠果中还存在少量其他成分，如生物碱类有：3-吲哚甲醛、allantoin、indole-3-acetylaspartic acid、2-甲基-6-(2,3,4-三羟基丁基)吡嗪等。赵丹丹等从文冠果花中分离鉴定出对羟基苯甲酸甲酯等。落果黄酮部位中含有芦丁及其他14种未知的黄酮单体化合物，其中芦丁的质量分数为27 mgg-1，占文冠果落果总黄酮的6%左右。文冠果中木脂素类成分还报道了醉蝶花素B和醉蝶花素D等。

1.2黄酮类黄酮类成分主要存在于文冠果叶和茎等部位中。关于文冠果叶的化学成分，M.Victor Plouvier等学者于1966、1968年先后报道了其小叶含杨梅树皮苷并分离鉴定了该化合物，黄酮作为茎、叶的主要有效成分包括黄酮醇、二氢黄酮、黄烷等亚类，母核结构（图4）。

张东等采用气相色谱法从文冠果油中共分析出12种脂肪酸，含量较高的分别是亚油酸（40.89％～43.20％）、油酸（29.63％～31.66％）和芥酸（8.29％～8.45％），单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的比例在1.08～1.20。ZHANG Y等建立了超高效液相色谱-四极杆质谱（UHPLC-MS），同时定量测定了10种文冠果的化学成分。

1.4苯丙素类从文冠果中分离得到的苯丙素类成分，大多数为香豆素类成分。属于a母核的有：杨梅树皮苷、槲皮素、槲皮苷、杨梅素、山柰酚、木犀草素、山柰酚-3-O--L-吡喃鼠李糖苷、3-O-甲基槲皮素、山柰酚-3-O--D-吡喃葡萄糖苷、异槲皮苷、鼠李柠檬素、异杨梅树皮苷、柯依利素、山柰酚-3-O-(2-O--L-鼠李糖基)--D-葡萄糖苷、芦丁、槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

蒽醌类成分包括大黄酚、大黄素、大黄素甲醚。另外，GE HQ等从文冠果果壳中分离得到2个新的异恶唑啉化合物，并发现其骨架具有潜在的平喘和抗过敏活性。文冠果化学成分除以上几类化合物之外还有：文冠木素、1-O-甲基-肌-肌醇、对苯二酚、对羟基苯乙腈、花椒毒素、二氢红花菜豆酸-3ʹ-O--D-葡萄糖苷。赵丹丹等在文冠果花中鉴定出异东莨菪素，于丽丽在文冠果种粕中分离得到秦皮乙素、东莨菪苷。

麻起等采用气相色谱的分析方法显示文冠果油中主要含有棕榈酸、油酸、亚油酸等7种主要脂肪酸，其中亚油酸含最高为45.1%，其次是油酸、棕榈酸，大部分为不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸总量达到90%以上。李国倩等采用分光光度法测定文冠果果壳总多酚为10.22 mgg-1，其中文冠果果壳醇提物大孔树脂30%乙醇洗脱部位的总多酚最高（4.92 mgg-1），抗氧化活性最强。

张文霞等从文冠木中得到七叶内酯，李占林、李在留等从文冠果种皮及果壳中分离出东莨菪素、异秦皮啶、臭矢菜素B、臭矢菜素D及isofraxetin-6-O--D-glucopyranoside。文献中通过超声提取法、机械压榨法、微波辅助提取、水酶法、热盐水法、索氏提取法、超临界CO2萃取法提取文冠果油后普遍采用GC-MS技术对文冠果油的总脂肪酸组成和含量进行了检测分析。

1.5甾体文冠果中的甾体类成分包括过氧化麦角甾醇、5,8-表二氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3-醇、9(11)脱氢过氧化麦角甾醇、-谷甾醇、胡萝卜苷、-菠菜甾醇、-菠菜甾醇-3-O--D-吡喃葡萄糖苷、(3,5,20R,24S)-豆甾-7,反-22-二烯-3-醇、(3,5,20R,24R)-豆甾-7-烯-3-醇、22,23-二氢--菠甾酮、豆甾醇乙酸酯以及豆甾-7-烯-3-醇等。对于黄酮类成分，邵彩云等采用分光光度法，以芦丁为指标成分，测定了文冠木地上部分不同部位的总黄酮含量，其茎黄酮含量最高。